Ratones:

Ratones machos (al menos 2 meses de edad, de cualquier cepa con buen rendimiento de cría)

Materiales y equipos:

• Aguja quirúrgica curva (por ejemplo, tamaño 10, triangular),

• Balanza,

• Clips de sutura y aplicador,

• Hilo de sutura quirúrgica (número 5-0),

• Jaulas limpias,

• Jeringa de 1 ml,

• Antiséptico (Por ejemplo: Polividona Yodada),

• Mechero de alcohol o Bunsen,

• Pinzas,

• Pinzas de relojero número 5, dos pares (un par si se utiliza la cauterización),

• Placa de calentamiento,  almohadilla de calefacción, o 50W bombilla,

• Tijeras de disección fina,

• Toalla de papel,

• Campana de flujo laminar,

• Anestesia,

• Etanol 70%.

Procedimiento:

1.    Pese y anestesie el ratón por inyección vía intraperitoneal (IP).

2.    Coloque el ratón decúbito dorsal para exponer el abdomen. Si es requerido por las normas y reglamentos locales afeite el abdomen del ratón y aplique etanol 70% en el abdomen.

3.    Para acceder a la cavidad corporal, corte la piel con tijeras finas de disección, haciendo una incisión transversal de 1.5 cm. en nivel con la parte superior de las piernas. Haga una incisión transversal de tamaño similar en la pared corporal; ponga un punto a través de la pared corporal en un lado de la incisión con una aguja quirúrgica curva y deje un pedazo de hilo de sutura en el lugar (esto ayuda a encontrar la pared corporal posteriormente). Ambos testículos se pueden alcanzar a través de esta única incisión.

4.    Usando pinzas romas tome y tire suavemente una de las almohadillas de grasa testicular. Los testículos asociados, vasos o conductos deferentes y epidídimo vendrán con la almohadilla de grasa. Los vasos deferentes se encuentran por debajo del testículo y se puede reconocer por un vaso sanguíneo que corre a lo largo de un lado. Sostenga el conducto deferente con un par de pinzas de relojero y córtelo con unas tijeras finas o cauterice con las puntas al rojo vivo de un segundo par de pinzas de relojero de tal forma que una parte de los vasos deferentes sea removido (1 cm. aprox.).

5.    Tome la almohadilla de grasa con pinzas romas y cuidadosamente coloque el testículo dentro del interior de la cavidad corporal.

6.    Repita los pasos 4 y 5 en el otro testículo. Es aconsejable mantener las partes removidas de ambos conductos deferentes sobre una toalla de papel al lado del ratón. Con esto se asegura que ambos vasos deferentes de cada ratón fueron removidos.

7.    Suture la pared corporal con dos o tres puntos de sutura. Luego suture la piel o sujétela con clip de sutura.

8.    Al final del procedimiento, coloque el ratón en una jaula limpia y mantenga en calor bajo una bombilla de 50W de luz (teniendo cuidado de cubrir los ojos) o coloque la jaula en una placa o almohadilla temperada hasta que el ratón se recupere de la anestesia inyectada. Siga el reglamento del comité local de cuidado y uso de los animales para más detalles.

Artículo: Marta Treimun 

Fotos: Adriana Barriento